Olyckan skedde utanför Zamora, Spanien, natten till torsdag.
Även Jotas bror André Silva dog i olyckan. Silva var också fotbollsspelare, och spelade i FC Penafiel i den portugisiska andradivisionen.
Spansk polis säger i ett uttalande att bilen de färdades i körde av vägen, efter en däckpunktering som uppstod vid en omkörning, och fattade sedan eld. Inga andra fordon ska ha varit inblandade.
Polis, brandkår och medicinsk personal var snabbt på plats men kunde inte rädda brödernas liv, skriver spanska AS.
Tyst minut i EM
Fotbollsanfallaren Diogo Jota spelade för Liverpool i Premier League och i det portugisiska landslaget. Han blev 28 år.
Portugals fotbollsförbund sörjer landslagsspelaren.
”Han var inte bara en fantastisk spelare. Han var också en extraordinär person som var respekterad av alla hans lagkamrater och motståndare. Han hade en smittsam glädje och var en referenspunkt i sin gemenskap”, skriver ordföranden Pedro Proença i ett uttalande.
I samma inlägg ber Proença och Portugals fotbollsförbund Uefa om att hålla en tyst minut inför landets EM-match mot Spanien på torsdagskvällen. Uefa bekräftade senare att det kommer hållas en tyst minut inför torsdagens och fredagens matcher i mästerskapet, och att Portugal kommer bära sorgband i sin match.
Vann flera titlar
Jotas klubblag Liverpool uttalar sig:
”Vi är förkrossade av Diogo Jotas tragiska bortgång. Klubben kommer inte kommentera saken vidare vid denna tidpunkt och ber alla respektera privatlivet för Diogos familj, vänner, lagkamrater och klubbpersonalen medan de försöker hantera denna otänkbara förlust”, skriver Liverpool på sin webbplats.
Jota gick till Merseyside-klubben inför säsongen 2020-2021, och var med och vann Premier League-titeln i år. Han vann också FA-cupen och ligacupen under sin tid i klubben.
Den gångna säsongen gjorde anfallaren 9 mål och 4 assist på 37 framträdanden i Liverpool.
Jota kom till klubben från ligarivalen Wolverhampton. Han spelade också i Atlético Madrid och Porto under sin karriär.
Med Portugal vann spelaren Nations League två gånger.
Jota gifte sig i slutet av juni med sin partner, han lämnar efter sig tre barn.